DETECÇÃO, CLONAGEM E ANÁLISE IN SILICO DO GENE PARASPORINA 4 EM LINHAGENS DE BACILLUS THURINGIENSIS

Bacillus thuringiensis (Bt) é uma bactéria gram-positiva que possui suas linhagens estudadas principalmente para o controle de insetos-praga, devido à capacidade inseticida da maioria de suas proteínas (Cry e Vip). Porém, recentes estudos apontam a presença de outras proteínas com ação inseticida pouco conhecida, mas de grande importância nas pesquisas envolvendo este microrganismo. Essas proteínas denominadas Parasporinas (PS) possuem atividade citotóxica e apresentam seis subfamílias consideradas potenciais fármacos no tratamento do câncer. Dada a grande incidência de casos de câncer no mundo e a necessidade de novas alternativas de tratamento, o presente trabalho teve por objetivo a caracterização de linhagens de B. thuringiensis como potenciais fontes da proteína PS4, sendo a menos estudada dentre as da subfamília. A seleção das linhagens foi realizada por meio da técnica de PCR (Reação da Polimerase em Cadeia) com primers específicos para o gene ps4, seguida pela clonagem e sequenciamento dos amplicons das amostras positivas, no sentido de se estabelecer uma análise in silico das sequências obtidas em comparação àquelas existentes no banco de dados GenBank.O presente estudo permitiu a seleção de uma linhagem portadora do gene ps4, denominada B. thuringiensis coreanensis, cuja sequência parcial do mesmo permitiu a análise de identidade com as sequências do banco de dados e a observação de que o gene ps4 encontra-se localizado em um plasmídeo. Portanto, esta linhagem poderá ser fonte do gene para futuros experimentos de expressão e caracterização dos efeitos citotóxicos da Parasporina 4 frente a diferentes tipos de tumores