ANÁLISE IN SILICO PARA A PREDIÇÃO DE INTERAÇÕES MICRORNA-GENE EM ESPERMATOZOIDES DE CARNEIROS MORADA NOVA

Objetivou-se detectar, com auxílio de bioinfomática, possíveis miRNAs envolvidos na regulação da expressão de genes da membrana de espermatozoides epididimários e ejaculados de carneiros Morada Nova. Para isto, foram coletadas amostras frescas de sêmen de seis carneiros adultos (utilizando-se vagina artificial) para obtenção dos espermatozoides. Posteriormente, os carneiros foram abatidos e os epidídimos coletados para obtenção dos espermatozoides. As proteínas das membranas espermáticas foram extraídas, separadas por eletroforese bidimensional (2D-PAGE), posteriormente, digeridas com tripsina e submetidas à espectrometria de massas. A nomenclatura dos genes codificadores das proteínas foi obtida no banco de dados UniProt (https://www.uniprot.org/). A lista de genes foi submetida à plataforma miRNet 2.0 (https://www.mirnet.ca/). Na membrana do espermatozoide ejaculado, os genes-alvo mais significativos foram LGALS3BP, PDHB, HSPA9, GPD2 e TUBB4A; e na membrana do espermatozoide epididimário foram: PDHB, HSPD1, HSPA9 e DLAT. Dentre as funções dos miRNAs associados a estes genes, destacam-se: ciclo celular, diferenciação celular, apoptose, proliferação celular, metabolismo de lipídeos. O mir-34a-3p e o mir-34a-5p estavam presentes em ambos espermatozoides e associados a todas as funções biológicas significativas. A investigação dos miRNAs espermáticos pode contribuir para detecção de potenciais marcadores da fertilidade espermática.